可的松檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

ELISA操作孵育過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答：
1） 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；

2） 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。

3）孵育溫度未按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行，溫度過(guò)高或過(guò)低；

解決辦法：
1） 貼封片或加蓋；

2） 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間和孵育溫度。

通用名稱(chēng)：可的松檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱(chēng)：Cortisol ELISA
產(chǎn)品貨號(hào)：EIA1887
產(chǎn)品規(guī)格：96T
檢測(cè)樣本：血清和血漿
公司品牌：德國(guó)DRG
儲(chǔ)存條件：2-8℃
檢測(cè)方法：ELISA方法
預(yù)期用途：可用于人血清和血漿中可的松的定量檢測(cè)
參考價(jià)格：詢(xún)價(jià)
供應(yīng)商家：深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司

可的松檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途
可的松檢測(cè)試劑盒用于人血清、血漿中可的松含量的定量檢測(cè)。

可的松前言簡(jiǎn)介

皮質(zhì)醇(氫huà可的松，復(fù)合物F)是人體中一種主要的糖皮質(zhì)激素，它是由腎上腺皮質(zhì)的束狀帶產(chǎn)生的。90%的循環(huán)皮質(zhì)醇會(huì)結(jié)合到皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白（CBG，皮質(zhì)激素傳遞蛋白）上，7%的循環(huán)皮質(zhì)醇會(huì)結(jié)合到白蛋白上，僅1-3%的循環(huán)皮質(zhì)醇是以游離狀態(tài)存在。僅僅游離狀態(tài)的皮質(zhì)醇才具有活性。游離皮質(zhì)醇釋放到唾液中，并作為皮質(zhì)醇的一小部分代謝產(chǎn)物從腎臟排出。血液中游離皮質(zhì)醇的水平可以以負(fù)反饋的形式通過(guò)下丘腦分泌的CRH（促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素）和垂體分泌的ACTH（促腎上腺皮質(zhì)激素）來(lái)調(diào)節(jié)皮質(zhì)醇的分泌，但皮質(zhì)醇的水平也會(huì)受各種因素的影響。人體內(nèi)的皮質(zhì)醇有一個(gè)生理波動(dòng)，在早晨達(dá)到峰值，在夜間則降至低水平。血漿皮質(zhì)醇的這種起伏波動(dòng)在唾液中可表現(xiàn)為：在人醒后的90分鐘內(nèi)達(dá)峰值。糖皮質(zhì)激素分泌不正常的疾病可通過(guò)皮質(zhì)醇的檢測(cè)表現(xiàn)出來(lái)，如：庫(kù)欣綜合征和阿森氏疾病。因?yàn)槠べ|(zhì)醇水平存在著日變化，所以在做個(gè)體皮質(zhì)醇篩查或動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)（如地塞米松抑制實(shí)驗(yàn)或ACTH刺激實(shí)驗(yàn)）時(shí)應(yīng)多采集幾個(gè)時(shí)段的樣品。唾液樣品的采集是一個(gè)簡(jiǎn)單的采樣方法，不需要方法靜脈穿刺取樣。孕婦、甲狀腺功能低下、腎病綜合征、明顯肥胖和接受了不同藥物治療（包括口服bì孕藥）患者的CBG水平可能會(huì)不正常，所以建議檢測(cè)其唾液皮質(zhì)醇。

可的松檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理

可的松ELISA試劑盒是基于競(jìng)爭(zhēng)法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒。微孔板中包被有抗可的松特異性單克隆抗體，樣品中的可的松與HRP綁定的可的松競(jìng)爭(zhēng)。洗板后，加入底物液孵育，之后再加入終止液。所綁定的過(guò)氧化物酶的量與樣品中的可的松濃度成反比。

可的松檢測(cè)試劑盒組成成分
●微孔板——12×8包被有抗可的松抗體
●標(biāo)準(zhǔn)品（SD 0-6）——7×1ml
●濃度0、20、50、100、200、400、800ng/ml
●換算0,  55.2,  138,  276,  552, 1104,  2208 nmol/L
●換算系數(shù)——1 ng/mL = 2.76 nmol/l——含0.3%Proclin 作為防腐劑
●酶聯(lián)物——1×25ml——即用型 含HRP結(jié)合的可的松
●底物液——1×14ml——即用型 含TMB
●終止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸
●洗滌液——1×30ml——40倍濃縮

可的松檢測(cè)試劑盒檢測(cè)方法
●洗液稀釋
●30ml+1170ml蒸餾水 混勻
●室溫下2周穩(wěn)定
●檢測(cè)開(kāi)始前將試劑盒所有組分穩(wěn)定至室溫

可的松檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件
可的松ELISA試劑盒保存在2-8℃下，效期內(nèi)有效。

可的松檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
●加入20ul標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品、樣品到各自的孔
●每孔加200ul酶聯(lián)物，混勻
●室溫下孵育60分鐘（不用蓋板）
●倒出孔內(nèi)液體，用洗液3×400ul洗滌
●加入100ul底物液
●室溫下孵育15分鐘
●每孔加入100ul終止液
●450nm下讀取吸光值，不超過(guò)加入終止液后的10分鐘

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