糖類抗原72-4（CA72-4）檢測試劑盒（酶聯免疫法）

ELISA操作終止及讀板過程常見問題及解答

1. 終止液加樣時產生氣泡；

2. 終止不均勻

3. 酶標板板底臟污

4. 讀數波長錯誤，

5. 終止液加入后，長時間不讀板

解決辦法：

1. 加終止液時，應避免起泡，以免造成假陽性

2. 終止液加入后應輕輕振板，使終止液與板孔內溶液充分混勻；

3. 酶標板讀數前，應輕輕拭去板底的水跡和污物，保證板底干潔，以免影響讀數；

4. 應根據底物液選擇合適的讀數波長，如TMB一般選擇450nm波長，PNPP一般選擇405nm波長等；

加入終止液后，應盡快讀板，酶標板內顏色會隨著終止時間的延長而變淡，因此，*是在終止后10分鐘內讀板。

通用名稱：糖類抗原72-4檢測試劑盒（酶聯免疫法）
英文名稱：TM-CA72-4ELISA
產品貨號：EIA5071
產品規格：96T
檢測樣本：血清、血漿
公司品牌：德國DRG
儲存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預期用途：用于在人體血清或血漿中定量檢測腫瘤相關抗原CA72-4 ，僅供體外診斷使用，可用于臨床使用。
參考價格：詢價
供應商家：深圳市科潤達生物工程有限公司

TM-CA72-4ELISA檢測試劑盒預期用途
    TM-CA72-4ELISA試劑盒用于在人體血清或血漿中定量檢測腫瘤相關抗原CA72-4 ，僅供體外診斷使用。

糖類抗原72-4前言簡介
     CA72-4(癌抗原72-4)最初被描述為由B72.3識別的抗原因子。B72.3是由相應的原發腫瘤轉移后的膜萃取物免疫雜交生產的鼠單克隆抗體。CA72-4被證實是1MDa的粘液樣糖蛋白，合成物稱為TAG72（腫瘤相關抗原72）。TAG72蛋白的分子量為48KD. 血清和血漿中的CA72-4的水平升高見于某些惡性疾病，包括胰、胃、膽、結腸、乳腺、卵巢、子宮頸、子宮內膜的腫瘤。它對胃腸道和卵巢的腫瘤有很高的診斷學的敏感性。盡管在一些良性的疾病如風濕病和卵巢囊腫也發現有CA72-4的升高，但是臨床研究表明，對于胃腸道和卵巢腫瘤，特異性診斷高達95％。CA72-4的水平和腫瘤的大小及分級緊密關聯。CA72-4是胃腸道腫瘤的病人選擇治療學的監測和隨后的護理的指標。另外合適的指標是CA199和CEA，另外，CA72-4是卵巢腫瘤的病人選擇治療學的監測和隨后的護理的可靠性指標，尤其是對于CA125陰性的病人。

TM-CA72-4ELISA檢測試劑盒檢測原理
      DRG公司的TM-CA 72-4酶免實驗是一種基于夾心法原理的固相酶免吸附實驗（ELISA）。反應板上的微檢測孔包被有能結合CA72-4分子上*抗原位點的單克隆小鼠抗體。一份含有內源性CA72-4的病人樣本在包被孔中與酶聯物進行孵育，該酶聯物是一種聯結有辣根過氧化物酶的抗CA72-4抗體。孵育后，用洗滌液洗去未結合的酶聯物。結合上的辣根過氧化物酶的總量與樣本中CA72-4的濃度成正相關。加入底物溶液后，顯出的顏色強度與病人樣品中CA72-4的濃度成正比。

糖類抗原72-4檢測試劑盒組成成分
●微孔板：12×8孔，可拆，微孔中包被抗CA72-4 單克隆抗體。
●標準品（標準品0-4）：5支 0.5ml，即用，濃度為0,3，20，50，100U/ml，內含無mercury防腐劑。
●質控高&低：2支 凍干粉，0.5ml，見“試劑準備"，質控品的濃度及范圍請見試劑瓶標簽或質控單。內含無mercury防腐劑。
●樣品稀釋液：一支，3ml，即用，內含無mercury防腐劑。
●酶聯物：1支 1.4ml，10倍濃縮，標記辣根過氧化物酶的抗CA72-4抗體，內含無汞防腐劑。
●酶聯物稀釋液：一支，14ml，即用型，含無汞防腐劑。
●底物液：一支 14ml，即用。
●終止液：0.5M的硫酸，一支 14ml，即用，避免接觸終止液，以免刺激或著燒皮膚。
●洗滌液（40X）：一支 30ml.注意：用于樣品稀釋的樣品稀釋液應視需要而定。

糖類抗原72-4檢測試劑盒檢測步驟
●將實驗所需數目的板條固定在板架上。
●用一次性吸嘴將20µL的標準品﹑質控品和樣品加入相應的檢測孔中。
●每孔加入100µL的新鮮配制的酶聯物。*混合十秒，在此步驟里，充分搖勻十分重要。
●在室溫下溫育120分鐘。
●快速棄去檢測孔中的內含物，每孔用400µL洗滌液洗板五次，在吸水紙上用力拍板以除去殘留的液體。
●每孔加入100µL的底物液。
●在室溫下溫育30分鐘。
●每孔加入100µL的終止液終止反應。
●在加終止液后十分鐘內，室溫下，于450±10nm處讀取吸光率。

糖類抗原72-4檢測試劑盒儲存條件
     TM-CA72-4ELISA試劑盒在2-8℃下儲存，在保質期內保持其穩定性。不要使用過期的試劑。所有開啟了的試劑都應在2-8℃下儲存，2個月內有效。

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