鐵調素檢測試劑

通用名稱：鐵調素-25檢測試劑盒（酶聯免疫法）
英文名稱：Hepcidin 25 bioactive ELISA
產品規格：96T
產品貨號：EIA 5258
產品品牌：德國DRG
檢測方法：ELISA
供應商家：深圳市科潤達生物工程有限公司

預期用途
鐵調素檢測試劑可用于血清、肝素血漿中鐵調素-25的體外定量檢測（僅用于科研使用。）

鐵調素介紹

鐵調素是人體內的一種鐵平衡調節多肽。活性多肽鐵調素-25主要是在肝臟中產生，通過蛋白質溶解切割前鐵調素的C-端的25個氨基酸所產生的。隨后，N-端的鐵調素-25轉化為更小的多肽（大約20~24個氨基酸），這些多肽活性更低并且在尿液中累積。

近年來，隨著鐵調節肽一鐵調素(hepcidin)的發現，人們對慢性腎臟病(chronic kidney disease，CKD)貧血的病理生理機制的認識顯著提高。在CKD患者中，鐵調素的清除減少及慢性炎癥狀態的存在使得血清鐵調素水平升高。對于鐵調素多種影響因子及信號通路的研究發現為治療慢性腎性貧血的藥物研究開辟了新的方向。

檢測原理

鐵調素檢測試劑采用的是競爭酶聯免疫法微孔板上包被了能與生物活性鐵調素-25分子抗原位點特異性結合的單克隆抗體；樣本中的內源性鐵調素與生物素化鐵調素競爭結合包被抗體，溫育后洗去未結合的部分；加入鏈霉親和素-過氧化物酶復合物溫育，洗滌；加入底物液，短時間的孵育，發生顏色變化反應；樣本中鐵調素濃度與顏色的強度成反比。

鐵調素檢測試劑組成成分
注意：若有需要可額外訂購稀釋樣本的分析緩沖液

實驗所需材料（未提供）

●酶標儀（450±10nm）

●校準的變量移液器

●吸水紙

●去離子水或雙蒸水

●計時器

●半對數坐標紙或數據處理軟件

儲存條件
未開封的試劑在2-8℃下可保存至有效期，不要使用過期的試劑，開封的試劑和微孔板必須貯存于2-8℃，密封袋一旦打開后，應立即密封好，開封的試劑盒若按上述方法保存可保持2個月活性。

檢測步驟
每次實驗都應建立標準曲線
1、將實驗所需的板條固定于板架上
2、每孔加100ul的分析緩沖液
3、加20ul的標準品、質控品和樣本于相應的微孔內
4、每孔加入50ul的酶復合物，充分混勻10秒鐘
5、室溫下，溫育60分鐘（300~700rpm）
6、棄去孔內反應液，每孔加300ul的洗滌液洗板4次（手動）或400ul洗板3次（洗板機）
7、每孔加100ul的酶聯物
8、室溫下30分鐘（無需振搖）
9、重復步驟6
10、每孔加100ul的底物液
11、室溫下溫育20分鐘
12、每孔加100ul的終止液
13、加入終止液10分鐘內，在酶標儀450±10nm處檢測吸收值

 

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