組胺（β-咪唑乙胺）是人體中最重要的介質，它主要存在于過敏反應的起始階段（速發型過敏）。組胺是由組胺酸經脫氨基作用產生的。組胺幾乎存在于機體的所有組織中，主要儲存于柱狀細胞和嗜堿性粒細胞的異染性顆粒中。組胺通常都是以無活性的復合體性存在，只有當需要的時候才會釋放。像其它的介質一樣，組胺不僅能調節過敏反應的各種臨床癥狀，也可以調節終止過敏反應的一系列效應。組胺在組織中的生物活性是通過三種受體來完成的，它們分別是H1，H2和H3受體。臨床檢測組胺的方法有：定量檢測各種速發型過敏反應中嗜堿性白細胞釋放組胺的量，也可以檢測過敏藥物治療后各種體液（血漿，尿液，細胞培養上清）中組胺的量。

【檢測原理】

組胺（Histamine）檢測試劑盒利用的是競爭法的原理。樣品中未知量的抗原和一定量的酶標抗原競爭性結合包被在微孔中的抗體結合位點上。溫育后洗板以終止競爭反應。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成反比。樣品的實驗結果可以從標準曲線上直接獲取。

【儲存條件】

試劑盒必須在2~8℃的環境下運輸和儲存，避免太陽直射。樣品的儲存與穩定性及試劑準備將在相關章節中闡述。如果將微孔板密封并儲存于2~8℃的環境下時，試劑在有效期內穩定。

【實驗步驟】

1	將酰化處理過的標準品、質控品和病人樣品分別50uL加入到相應的微孔中。
2	在每一微孔中加入50uL臨時配置好的酶聯物。
3	在每一微孔中加入50uL組胺抗血清。
4	蓋板，振蕩器（500rpm）上室溫溫育3小時。
5	移去封板紙，棄取孔內反應物，每孔用250uL稀釋好的洗滌液洗板4次，吸水紙上拍干除去殘余液體。
6	如果有條件的話，可以用8道移液器加底物液和終止液。加底物液和終止液時，每孔的時間間隔應當相同。使用主動置換型移液器并避免氣泡產生。
7	在每一微孔中加入100uL TMB底物液。
8	血漿：振蕩器（500rpm）上室溫溫育40min。尿液/細胞培養上清：振蕩器（500rpm）上室溫溫育20min。
9	在每一微孔中加入100uL TMB終止液以終止底物反應。輕輕振板使溶液混合均勻。
10	加終止液后15min內450nm處讀取OD值。（參考波長：600-650nm）

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