總?cè)饧谞钕僭彼釞z測(cè)試劑盒（定量）用于人血清和血漿中總T3的體外定量檢測(cè)

【前言簡(jiǎn)介】

科潤(rùn)達(dá)生物代理的這款試劑盒是進(jìn)口試劑盒，用于檢測(cè)樣本中的總?cè)饧谞钕僭彼幔?/span>T3），血清三碘甲狀腺原氨酸濃度的測(cè)定通常被認(rèn)為是診斷甲狀腺功能異常的有價(jià)值工具。這一重要性為過(guò)去20年發(fā)生的分析方法學(xué)的重大改進(jìn)提供了動(dòng)力。單一特異性抗血清的出現(xiàn)和阻斷劑對(duì)T3結(jié)合血清蛋白的發(fā)現(xiàn)，使得發(fā)展簡(jiǎn)單的放射免疫分析成為可能。

【檢測(cè)原理】

總?cè)饧谞钕僭彼幔?/span>T3）ELISA試劑盒是基于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合原理的固相酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。

微量滴定板上包被有多克隆山羊抗小鼠抗體。標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和患者血清與含有抗T3的單克隆抗體的分析試劑一起孵育。在后續(xù)的孵育過(guò)程中，患者樣品的內(nèi)源性T3與T3辣根過(guò)氧化物酶綴合物競(jìng)爭(zhēng)有限數(shù)量的固相結(jié)合位點(diǎn)。孵育后，將未結(jié)合的共軛物洗掉。

結(jié)合過(guò)氧化物酶結(jié)合物的量與樣品中T3的濃度成反比。添加底物溶液后，顯色強(qiáng)度與患者樣品中T3的濃度成反比。

【檢測(cè)方法】

試劑準(zhǔn)備

洗滌液：洗滌液加入蒸餾水，制成洗滌液，充分混勻。

檢測(cè)步驟

總?cè)饧谞钕僭彼釞z測(cè)試劑盒（定量）檢測(cè)前，所有試劑和樣本需在室溫平衡30min，試劑混勻并避免起泡。一旦實(shí)驗(yàn)開(kāi)始，所有步驟不能被打斷。注意更換槍頭，避免污染。孵育步驟嚴(yán)格按照時(shí)間和溫度進(jìn)行。

1） 取所需數(shù)目的板條。

2） 將標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品分別50μl加入到相應(yīng)的微孔中，注意更換槍頭。

3） 每孔加入50ul分析試劑，混勻10秒鐘，這步驟很重要。

4） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

5） 在每一微孔中加入50μl酶聯(lián)物，輕輕振板混勻10秒鐘，混勻步驟很重要。

6） 室溫（18-25℃）溫育30分鐘。

7） 棄取孔內(nèi)反應(yīng)液，每孔用300μl稀釋好的洗滌液洗板5次。最后在吸水紙上拍干除去殘余液體。清洗過(guò)程的正確與否對(duì)測(cè)定結(jié)果的靈敏度和精密度有很大影響。

8） 在每一微孔中加入100μl TMB底物液。

9） 室溫（18-25℃）溫育10分鐘。

10） 在每一微孔中加入100μl 終止液以終止底物反應(yīng)。

11） 加終止液后10分鐘內(nèi)450nm處讀取OD值。

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