降鈣素試劑盒（酶聯免疫檢測法）

ELISA方法操作孵育過程常見問題及解答
1） 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2） 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。

3）孵育溫度未按照說明書要求進行，溫度過高或過低；
解決辦法：
1） 貼封片或加蓋；
2） 按說明步驟嚴格控制操作時間和孵育溫度。

通用名稱：降鈣素試劑盒（酶免法）
英文名稱：Calcitonin ELISA
產品貨號：NM59011
產品規格：96T
檢測樣本：血清
公司品牌：德國IBL
儲存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預期用途：可用于人血清中降鈣素的定量檢測
參考價格：詢價
供應商家：深圳市科潤達生物工程有限公司

預期用途
此降鈣素檢測試劑盒可用于人血清中降鈣素的定量檢測。

檢測原理
此試劑盒采用雙位點酶免法檢測降鈣素完整的32氨基酸鏈。利用兩種不同的人降鈣素小鼠單抗，生物素標記的抗體結合降鈣素11-23的氨基酸，另外一個HRP標記的抗體結合21-32的氨基酸。實驗中，標準品，質控品或病人樣品與兩標記抗體同時加入至包被有鏈霉親和素的包被孔內溫育。

樣本中的降鈣素則會夾在兩抗體間，溫育結束后，洗去未結合成分，然后再加入底物液溫育，終止液加入終止反應，溶液顏色變為黃色，樣本中降鈣素的量與顏色的強度成正比，以標準品的吸收值和濃度做標準曲線，則樣本濃度可直接從標準曲線獲得

試劑盒組成成分
●微孔板——12×8——即用型、包被有鏈親和霉素
●試劑1——1×7.0ml——即用型、含生物素標記的降鈣素抗體
●試劑2——1×7.0ml——即用型、含HRP標記的降鈣素抗體
●試劑3——1×10.0ml——即用型、含EDTA的配制液
●試劑A——1×30.0ml——20倍濃縮洗滌液
●試劑B——1×20.0ml——即用型、含TMB
●質控品1+2——2×——凍干品、具體濃度見瓶身標簽
●標準品A~F——6×——凍干品、具體濃度見瓶身標簽
●終止液——1×20.0ml——即用型、含1N硫酸

降鈣素檢測所需材料（試劑盒內不提供）
●移液器，50,100和150ul體積
●振蕩器
●8-通道移液器
●洗瓶，自動或半自動洗板機
●酶標儀
●去離子水或蒸餾水
●吸水紙，槍頭，計時器

儲存條件
降鈣素檢測試劑盒應當在2~8℃運輸和儲存，避免高溫和陽光直射。

檢測步驟
●標準品，質控品和樣本吸取100ul至相應的孔內，剩余的標準品和質控用完后立即放回至-20℃凍存，不能儲存在自動除霜凍存機內
●每孔加100ul的試劑1
●每孔加50ul的試劑2
●蓋板，170±10rpm，室溫下（18-25℃）溫育4小時±30分鐘
●倒去孔內溶液，用工作洗滌液洗板5次，如果用全自動洗板機，則每孔加350ul的洗液洗滌
●每孔加150ul的試劑B（TMB底物液）
●蓋板，170±10rpm，室溫下（18-25℃）溫育30±5分鐘
●每孔加100ul的終止液
●加入終止液10min內在酶標儀上讀數，用250ul的去離子水校正450nm，同樣的校正405nm

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