過敏原總IgEelisa檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

elisa操作洗板 過程常見問題及解答
1） 采用手工洗板， 孔與孔之間液體交叉。
2） 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3） 反應板過多造成洗板等待時間長。
解決辦法：
1） 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后*在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2） 合理安排，或多用幾臺洗板機。

3 )  手工洗板，每次加液后浸泡30s左右，保證洗板的效果。

通用名稱：總IgE檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
英文名稱：Total- IgE ELISA
產品貨號：RE59061
產品規(guī)格：96T
檢測樣本：血清和血漿
公司品牌：德國IBL
儲存條件：2-8℃
檢測方法：ELISA方法
預期用途：可用于定量人檢測血清、血漿中總的IgE抗體的含量
參考價格：詢價
供應商家：深圳市科潤達生物工程有限公司

IgE簡介

人體中的IgE是一種特殊的免疫球蛋白，它是過敏反應的一種重要介導因素。反應的機制涉及到免疫活性的B淋巴細胞被特異性抗原所造成的抗原刺激。之后淋巴細胞產生幾種類型的抗體，其中IgE抗體通過它的FC部分結合到肥大細胞以及嗜堿性白血球的表面受體上，再次接觸到過敏原時，細胞表面綁定的IgE就會通過它們的Fab部分與過敏原結合。這一結合會引起肥大細胞以及嗜堿性白血球釋放各種血管活性胺到血液以及周邊組織中去。這些物質會引起平滑肌收縮并導致水痘、潮紅、麻疹、鼻炎、皮炎、花粉熱、哮喘以及過敏性休克。IgE檢測可有效的用于診斷已知或懷疑患有過敏性疾病的病人。正常情況下，IgE的值與年齡有關，并且在10-14歲急劇增加。有家族遺傳性過敏疾病的嬰兒及兒童有很高的風險會患有疾病，因此他們是主要的篩查對象。研究顯示哮喘、鼻炎、濕疹、蕁麻疹、皮炎以及一些蟲感染都有可能增加IgE水平。哮喘、花粉熱以及特異性濕疹病人會比正常病人IgE水平高出3-10倍。

試劑盒檢測原理

過敏原總IgEelisa檢測試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附法。微孔板上包被有單克隆的小鼠抗人IgE抗體。病人血清以及標準品加入到微孔中后，與之后加入的抗人IgE辣根過氧化酶結合物一同孵育。最后血清中的IgE與兩種抗體形成夾心復合物。洗板后加入TMD底物液孵育15分鐘，之后加入終止液顯出黃色。之后在450nm讀取吸光值，結果會與IgE濃度成正比。

總IgEelisa試劑盒預期用途

總IgE檢測試劑盒可用于定量人檢測血清、血漿中總的IgE抗體的含量。可進一步應用與其他體液的檢測，如有需要請聯(lián)系IBL的技術人員。

總IgE檢測試劑盒組成
●1×12×8——微孔板——包被有單克隆抗IgE抗體
●1×1ml-1×5×0.2ml——標準品A-F——標準品A 1mL
含量0、5、25、100、250、1000U/ml 含人血清PBS稀釋液 1%疊氮化吶
●20ml——酶聯(lián)物——羊抗IgE抗體與辣根過氧化酶結合物、蛋白緩沖液
●15ml——底物液——含TMB
●15ml——終止液——0.5M 硫酸
●60ml——洗滌液——10倍濃縮
●2 x——封板紙
●1 x——自封袋

總IgE檢測試劑盒檢測所需材料（試劑盒內不提供）
●10μl、200μl、500μl移液器
●酶標儀
●洗板機
●試管
●蒸餾水

總IgE檢測試劑盒檢測步驟
●選取好足夠數量的板條，放置在架子上。
●每個對應的孔中加入10μl樣品、標準品，然后每個孔加入200μl酶聯(lián)物。留一個孔做空白對照
●蓋板，在室溫下溫育30分鐘
●清空微孔，用300μl洗液洗3次
●每個孔加100μl底物液，室溫避光溫育15分鐘
●每孔加入100μl終止液
●60分鐘內在450nm下讀數（參照波長620nm）

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