測試前準備  

在進行測定之前，請仔細閱讀測試方案。結果可靠性取決于是否嚴格遵守所述的測試協議。以下測試程序僅對手動程序進行了驗證。如果在ELISA自動系統上進行測試，我們建議將洗滌步驟從3次升到5次，洗滌液體積從300μl增加到350μl，以避免洗滌步驟影響結果。在開始測定之前，應在試劑盒中提供的結果表中仔細確定所有標本和對照的分布和排版。選擇所需數量的微量滴定條或孔，并將其插入支架。  

請至少安排以下板孔  

1孔（如A1）：空白對照  

1孔（如B1）：陰性質控  

1孔（如C1+D1）：臨界質控  

1孔（如E1）：陽性質控  

如有必要，建議質控品和樣本做復孔測試  

按照給定的順序執行所有測定步驟，并且在步驟之間沒有任何明顯的延遲。應使用干凈的一次性吸頭來分配每個質控和樣品。將培養箱調整至37°C±1°C。  

1.將100μl質控品和稀釋樣品加入到各孔中。保留A1為基底空白。  

2.使用試劑盒中提供的蓋板膜蓋板。  

3.在37±1℃下孵育1小時±5分鐘。  

4.孵育完成后，移去鋁箔蓋板膜，棄去孔中的內容物，用300μl洗滌液洗滌各孔三次。避免溶液溢出反應孔。每個洗滌周期之間的浸泡時間應為>5秒。最后，在下一步之前，在吸水紙上拍干板孔中液體。  

注意：洗滌至關重要！洗滌不足導致精度差和吸光度值錯誤升高。  

5.將100μl酶結合物加入到除空白孔（例如A1）外的所有孔中。蓋板。  

6.室溫（20?25℃）孵育30分鐘。避免暴露在陽光下。  

7.重復步驟4。  

8.每孔加入100μlTMB底物溶液。  

9.在黑暗中室溫（20?25℃）孵育15分鐘。  

10.以與TMB底物溶液相同的順序和相同的速率將100μl終止液加入到所有孔中。